Elektroforese hva det er, hva det er for og hvordan det lages
Elektroforese er en laboratorieteknikk utført med sikte på å skille molekyler i henhold til deres størrelse og elektriske ladning, slik at diagnosen sykdommer kan stilles, proteinuttrykk kan verifiseres eller mikroorganismer kan identifiseres.
Elektroforese er en enkel og rimelig prosedyre som brukes i laboratorierutiner og i forskningsprosjekter. I henhold til formålet med elektroforesen kan det være nødvendig å utføre andre tester og eksamener for å oppnå en diagnose, for eksempel.
Hva er det for
Elektroforese kan utføres til forskjellige formål, både i forskningsprosjekter og til diagnose, siden det er en enkel og rimelig teknikk. Dermed kan elektroforese utføres for å:
- Identifiser virus, sopp, bakterier og parasitter, med denne applikasjonen som er mer vanlig i forskningsprosjekter;
- Farskapstest;
- Sjekk uttrykk av proteiner;
- Identifisere mutasjoner, for eksempel å være nyttige i diagnosen leukemi;
- Analyser typene av sirkulerende hemoglobin, og er nyttige ved diagnosen sigdcelleanemi;
- Vurder mengden proteiner som er tilstede i blodet.
I henhold til formålet med elektroforesen, kan det være nødvendig å utføre andre komplementære tester for legen for å fullføre diagnosen.
Hvordan det gjøres
For å gjøre elektroforese er det nødvendig at gelen, som kan være av polyakrylamid eller agarose avhengig av objektivet, elektroforesebuffer og kar, molekylvektmarkør og et lysstofffarge, i tillegg til et UV- eller LED-lysutstyr, også kjent som transilluminator.
Etter klargjøring av gelen, må en spesifikk gjenstand plasseres slik at brønnene lages i gelen, populært kalt kammen, og la gelen sette seg. Når gelen er klar, bare bruk stoffene på brønnene. For dette må en molekylvektmarkør plasseres i en av brønnene, en positiv kontroll, som er stoffet som er kjent hva det er, en negativ kontroll, som garanterer gyldigheten av reaksjonen, og prøvene som skal analyseres. Alle prøver må blandes med et lysstofffarge, da det på denne måten er mulig å visualisere båndene på transilluminatoren..
Gelen med prøvene må plasseres i elektroforese-karet, som inneholder den spesifikke bufferløsningen, og deretter blir enheten slått på slik at det er elektrisk strøm og følgelig potensialforskjell, noe som er viktig for separasjonen partikler i henhold til deres belastning og størrelse. Den elektroforetiske kjøretiden varierer i henhold til målet med prosedyren, og kan vare opptil 1 time.
Etter den bestemte tiden er det mulig å se resultatet av den elektroforetiske gjennomkjøringen gjennom transilluminatoren. Når gelen plasseres under UV- eller LED-lys, er det mulig å visualisere båndmønsteret: jo større molekylet er, desto mindre er migrasjonen, og nærmere brønnen, mens jo lettere molekylet er, desto større er migrasjonspotensialet.
For at reaksjonen skal bli validert, er det nødvendig at båndene til den positive kontrollen blir visualisert og at i den negative kontrollen ingenting blir visualisert, fordi det ellers er en indikasjon på at det var forurensning, og hele prosessen må gjentas.
Typer elektroforese
Elektroforese kan utføres for forskjellige formål, og i henhold til dets formål kan flere typer gel benyttes, hvor den vanligste er polyakrylamid og agarose..
Elektroforese for å identifisere mikroorganismer er mer vanlig å utføres i forskningslaboratorier, men for diagnostiske formål kan elektroforese brukes til å identifisere hematologiske sykdommer og sykdommer som utvikler seg med økningen i mengden proteiner, som er de viktigste typene av elektroforese. :
1. Hemoglobinelektroforese
Hemoglobinelektroforese er en laboratorieteknikk som utføres for å identifisere de forskjellige typer hemoglobin som sirkulerer i blodet, noe som gjør det mulig å identifisere tilstedeværelsen av sykdommer relatert til hemoglobinsyntese. Type hemoglobin identifiseres ved hjelp av elektroforese ved en spesifikk pH, ideelt mellom 8,0 og 9,0, med et mønster av bånd som blir verifisert som kan sammenlignes med det normale mønsteret, noe som gjør det mulig å identifisere tilstedeværelsen av unormale hemoglobiner.
Hva den er laget for: Hemoglobinelektroforese utføres for å undersøke og diagnostisere sykdommer relatert til hemoglobinsyntese, for eksempel sigdcelleanemi og hemoglobin C sykdom, i tillegg til at de er nyttige i å differensiere thalassemia. Lær hvordan du tolker hemoglobinelektroforese.
2. Proteinelektroforese
Proteinelektroforese er en undersøkelse som legen har bedt om å vurdere mengden proteiner som sirkulerer i blodet og dermed for å identifisere sykdommer. Denne testen gjøres fra en blodprøve, som sentrifugeres for å oppnå plasma, den delen av blodet som blant annet består av proteiner.
Etter elektroforese kan et mønster av bånd visualiseres og deretter en graf der mengden av hver fraksjon proteiner er indikert, noe som er grunnleggende for diagnosen.
Hva den er laget for: Proteinelektroforese gjør det mulig for legen å undersøke forekomsten av multippelt myelom, dehydrering, skrumplever, betennelse, leversykdom, pankreatitt, lupus og hypertensjon i henhold til båndmønsteret og grafen presentert i undersøkelsesrapporten..
Forstå hvordan det gjøres og hvordan du kan forstå resultatet av proteinelektroforese.
